smarttubePROT1解凍樣品的解凍方案
加利福尼亞(ya) 州Smart Tube
一瓶蛋白質組穩定劑。體(ti) 積足以穩定一百五十五毫升全血樣本。還包括解凍在穩定劑中冷凍保存的樣品後使用的緩衝(chong) 液：THAWLYSE1“Thaw-Lyse，1000X Concentrate”。
所需緩衝(chong) 區：
1倍水樣(用蒸餾水稀釋1000倍濃縮液，使工作濃度達到1倍)。
緩衝(chong) 器應在室溫下
染色緩衝(chong) 液磷酸鹽緩衝(chong) 液0.5%牛血清白蛋白)緩衝(chong) 液應在4℃
可能需要的其他緩衝(chong) 區：
1倍緩衝(chong) 液2(用蒸餾水稀釋5倍濃縮液，使工作濃度達到1倍)。緩衝(chong) 器應在室溫下。
禮儀(yi) :
如果樣品沒有凍結，因為(wei) 分析將在同一天進行，請繼續進行第二步。在冷水浴(10°C至15°C)中用攪拌水(即.=‘class 1’>)解凍冷凍樣品.旋轉磁性 攪拌棒或使用軌道震動器)大約20分鍾，直到樣品*解凍。另一種方法是，在4°C冰箱的開式機架中解凍管子大約30分鍾，直到 樣品是*解凍的，不要使用泡沫塑料機架來保存樣品，因為(wei) 樣品要從(cong) -80°C快速過渡到*解凍狀態是很重要的。一旦樣品迅速解凍，m 敬下一步。
加入1倍的SAW-Lyse緩衝(chong) 液，比例為(wei) 4：1的穩定樣品(即。如果原始樣本為(wei) 全血1ml，則加入1.4ml穩定劑，總體(ti) 積為(wei) 2.4m 在穩定後，加入至少9.6ml的1xThaw-Lyse緩衝(chong) 液。將樣品在室溫下攪拌10分鍾。
600×g離心，室溫下離心5分鍾，取白細胞。扔掉上清液。
紅細胞溶解完成後，樣品再懸浮在染色介質中，轉移到FACS管或板上，用染色介質衝(chong) 洗。將樣品按600 x g離心5次 幾分鍾。現在可以像用多聚甲醛固定的白細胞一樣對樣品進行染色，使用固定細胞標準染色規程。注意進行細胞內(nei) 染色 細胞必須用酒精滲透。90%甲醇)或洗滌劑(即。0.2%的皂甙)作為(wei) 智能管道係統，就像傳(chuan) 統的固定方法一樣，產(chan) 生細胞膜為(wei) s的細胞 可滲透於(yu) 小分子染料，如碘化丙酸丙酯，但在其他方麵是完整的，不提供適當的抗體(ti) 進入細胞內(nei) 部，而不經alc進一步滲透。 酒精或洗滌劑。
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建議在一項研究中對用於(yu) 解凍樣品的條件(水浴溫度、攪拌和持續時間)進行標準化。
完整的紅細胞溶解通常是在步驟4之後實現的。室溫下穩定時間較長或樣品在4°C(或更高溫度)保溫時間較長 皺縮可能會(hui) 使紅細胞溶解更加困難。
如果紅細胞溶解在步驟4後未完成，請執行以下步驟：
A1.將球粒置於(yu) 大於(yu) 15 ml的1xLyse緩衝(chong) 液中，在室溫下孵育10分鍾，與(yu) 原藥丸相同，丟(diu) 棄上清液。如果球團是白色的，表示紅細胞溶解。 完成後，繼續上麵的步驟5。如果沒有，請繼續下麵的步驟A2。
A2.將球團置於(yu) 大於(yu) 15 ml的1倍Saw-Lyse緩衝(chong) 液中，在室溫下孵育10分鍾，與(yu) 以前相同，丟(diu) 棄上清液。球團應該是相對白色的，表示紅細胞溶解。 S是完整的。繼續執行上麵的第5步。
目錄編號 | 新零件號 | 老零件號 | 產(chan) 品名稱 | 描述 |
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PBS05 | 501351688 | NC0334362 | 智能管基站，標準型號 | 使用多達5個(ge) 智能管自動化溫度控製孵育和隨後的全血穩定，用於(yu) 表麵表位，磷酸表位，細胞內(nei) 細胞因子，細胞周期，其他測定的下遊單細胞分析。 |
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PROGRAM1P | 501351695 | NC1228060 | 智能管基站編程站 | 編程站是一個(ge) 手持設備，帶有LCD屏幕和鍵盤以及簡單的用戶界麵，用於(yu) 創建由基站執行的實驗協議（型號PBS05和PBS05-M1V-BSM1）。實驗協議存儲(chu) 在類似於(yu) 拇指驅動器的編程密鑰中。包括一個(ge) 編程密鑰。將編程密鑰插入基站並打開電源會(hui) 將存儲(chu) 在編程密鑰上的協議複製到基站。 |
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MTS1P 100 / CS | 501351690 | NC0618265 | 智能管，100箱 | 標準智能管，一百個(ge) 案例。優(you) 化使用1毫升全血。包括THAWLYSE1“Thaw-Lyse，1000X濃縮物”，解凍後儲(chu) 存在Smart Tubes中冷凍的樣品。還包括用於(yu) 處理解凍樣品的SERT1“一袋一百（100）個(ge) 處理插件”。查詢優(you) 化的智能管與(yu) 其他樣品量以及預先裝載生物製劑或感興(xing) 趣藥物的智能管一起使用。 |
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PROT1 | 501351689 | NC0500838 | Proteomic Stabilizer PROT1，大小：100個(ge) 測試 | 一瓶蛋白質組穩定劑。體(ti) 積足以穩定一百五十五毫升全血樣本。還包括解凍在穩定劑中冷凍保存的樣品後使用的緩衝(chong) 液：THAWLYSE1“Thaw-Lyse，1000X Concentrate”。 |
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PROT1-250ML | 501351692 | NC0627333 | Proteomic Stabilizer PROT1，大小：250毫升 | 250毫升的Proteomic Stabilizer PROT1瓶。當按照建議使用時，足以穩定超過170毫升的全血。還包括解凍在穩定劑中冷凍保存的樣品後使用的緩衝(chong) 液：THAWLYSE1“Thaw-Lyse，1000X Concentrate”。 |
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PROT1-1L | 501351691 | NC0618275 | Proteomic Stabilizer PROT1，大小：1升 | 1升一瓶Proteomic Stabilizer PROT1。當按照建議使用時，足以穩定超過700毫升的全血。還包括解凍在穩定劑中冷凍保存的樣品後使用的緩衝(chong) 液：THAWLYSE1“Thaw-Lyse，1000X Concentrate”。 |
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STBLYSE2-250 | 501351694 | NC1028711 | Stable-Lyse V2緩衝(chong) 液，大小：250毫升 | 250毫升Stable-Lyse V2緩衝(chong) 液瓶。該緩衝(chong) 液與(yu) Stable-Store V2緩衝(chong) 液結合使用，可存儲(chu) 全血樣品，在4攝氏度下臨(lin) 時存儲(chu) ，在-80攝氏度下長期存放。每250微升全血使用350微升。不得與(yu) 標準智能管或PROT1蛋白質組穩定劑一起使用。 |
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STBLSTORE2-250 |
| NC1409327 | 穩定存儲(chu) V2緩衝(chong) 液，大小：250毫升 | 250ml瓶裝Stable-Store V2緩衝(chong) 液。該緩衝(chong) 液與(yu) Stable-Lyse V2緩衝(chong) 液結合使用，可將全血樣品保存在4攝氏度的臨(lin) 時儲(chu) 存中，並在-80攝氏度下長期保存。 |
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STBLSTORE2-1000 | 501351693 | NC1028710 | 穩定存儲(chu) V2緩衝(chong) 液，大小：1000毫升 | 1000ml瓶裝Stable-Store V2緩衝(chong) 液。該緩衝(chong) 液與(yu) Stable-Lyse V2緩衝(chong) 液結合使用，可將全血樣品保存在4攝氏度的臨(lin) 時儲(chu) 存中，並在-80攝氏度下長期保存。每250微升全血使用1000微升。不得與(yu) 標準智能管或PROT1蛋白質組穩定劑一起使用。 |
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THAWLYSE1 | 501351696 | NC1255073 | Thaw-Lyse，1000X濃縮液，60毫升 | 60毫升Thaw-Lyse緩衝(chong) 液，1000倍濃縮液。解凍凍結在PROT1或Smart Tubes中的樣品後使用解凍 - 裂解緩衝(chong) 液。Thaw-Lyse緩衝(chong) 液溶解先前在PROT1或Smart Tubes中冷凍的樣品中的紅細胞。該緩衝(chong) 液以1000倍濃縮液的形式提供。 |
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LYSE2 | 501351697 | NC1255074 | 裂解緩衝(chong) 液2,5X濃縮物，500毫升 | 當處理預先在PROT1或Smart Tubes中冷凍的全血樣品時，裂解緩衝(chong) 液2用於(yu) 任選的第二紅細胞裂解步驟。除非穩定反應時間或溫度偏離標準方案，否則典型的全血樣品不需要該緩衝(chong) 液。 |
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SERT1 | 501351698 | NC1255075 | 加工插件，100袋 | 一袋一百（100）個(ge) 處理插頁。處理插入物在解凍先前在智能管中冷凍的樣品後使用。處理插入物用於(yu) 從(cong) 智能管中潷析血液樣本。 |
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MTS1PTRAY1 |
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| 用於(yu) 存放智能管的托盤 | 嵌套熱塑性托盤用於(yu) 智能管的冷凍庫存。 |
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