ChromoTek介紹
德國ChromoTek公司成立於(yu) 2008年，致力於(yu) 細胞生物學和蛋白質組學的研發與(yu) 研究，公司擁有強大的研發團隊，有先進的生物製劑，主要主要使命是花費較少的時間和成本，使客戶獲得得高質量的實驗數據。
德國ChromoTek公司 聯合中國專(zhuan) 業(ye) 的生物技術服務提供商－BioTNT,針對中國市場的實際情況，推出全世界可靠的GFP 相關(guan) 產(chan) 品。
ChromoTek的產(chan) 品分類：
一、Nano-Trap係列；以產(chan) 品結合物為(wei) 標準，包含磁珠係列和瓊脂糖珠子係列，還有96板係列；抗體(ti) 結合物包括GFP Trap，RFP Trap，GST Trap，Dnmt1-Trap；Mk2-Trap；P53-Trap；Mdm4/ HdmX-Trap
二、 Booster係列；含GFP booster RFP booster；
三、 可用於(yu) HCA 實驗的Chromobodies(質粒或細胞係形式)；
四、 高品質抗體(ti) （標簽蛋白抗體(ti) 和普通抗體(ti) ）；
產(chan) 品一：
GFP-Trap? —— 值得信賴的科研工具：
Nano-Trap：與(yu) agarose beads或者magnetic beads結合，在免疫沉澱或蛋白質相互作用的實驗中，可抓取或純化GFP或RPF融合蛋白。 （優(you) 點：三好三多）
優(you) 點一：抗體(ti) 好---------Nano-Traps采用的抗體(ti) 是基於(yu) alpaca的單域抗體(ti) 片段（VHHS）；具有分子量小（15Kda）、穩定（70℃仍保持穩定），高親(qin) 和力（高特異性性結合GFP蛋白），無普通抗體(ti) 輕鏈與(yu) 重鏈汙染等一係列優(you) 點等優(you) 點；GFP抗體(ti) 可以特異性結合綠色熒光蛋白的衍生物，如eGFP, wtGFP, GFP S65T，TagGFP，不與(yu) RFP衍生蛋白結合。
優(you) 點二：形式好-------抗體(ti) 結合了agarose beads（瓊脂糖珠子）或者magnetic beads（磁珠），在IP實驗，COIP ，pulldown，Chip實驗中可以直接取代特異性GFP 抗體(ti) +proteinA/G 瓊脂糖珠子；
優(you) 點三：效果好------孵化時間短（隻需5-30min），能夠更好與(yu) 結合，從(cong) 細胞提取物或細胞器中定量分離GFP融合蛋白及結合因子
優(you) 點四：實驗應用多：被廣泛用於(yu) 免疫沉澱、質譜分析、酶活測定、生物大分子相互作用/親(qin) 和力實驗、染色質免疫沉澱（ChIP）、蛋白質相互作用分析；
優(you) 點五：產(chan) 品多：有GFP Trap，RFP Trap，GST Trap，Dnmt1-Trap；Mk2-Trap；P53-Trap；Mdm4/ HdmX-Trap NEW!更多Trap 新品，給您提供更多的科研工具！GFP，RFP，GST Trap作為(wei) 標簽蛋白的特異性純化方法，Dnmt1-Trap；Mk2-Trap；P53-Trap；Mdm4/ HdmX-Trap 是用於(yu) 純化目的蛋白。
優(you) 點六：樣品類型多：mammalian cells（哺乳細胞）；tissues/ organisms（組織/器官樣本）；bacteria（細菌）；yeast （酵母）；plants （植物樣本）
僅(jin) 需六個(ge) 步驟，30min 僅(jin) 需6個(ge) 步驟，30min 實驗，Chromotek GFP-Trap?_A的5大實驗應用：
→→ →收集細胞 細胞裂解 平衡beads 結合蛋白 ,加入裂解的細胞 → 清洗beads → 洗脫蛋白
| 免疫沉澱 | 酶活測定 | Co-IP | Pull down | ChIP |
後期實驗 | Western blot | 酶活測定 | 沉澱的蛋白質複合物采用SDS-Page 跑膠，western blot鑒定預測作用蛋白Y，或樣品利用質譜後續分析。 | 洗脫的複合物；同時進行GFP和第二標簽的western blot 實驗。 | 交聯反應逆轉，純化，鑒定（如用QPCR 或者chip實驗），同普通CHIP 實驗 |
nano trap替代的產(chan) 品 | GFP單克隆/多克隆抗體(ti) +Protein A/G瓊脂糖微珠 | GFP單克隆/多克隆抗體(ti) +Protein A/G瓊脂糖微珠 | GFP單克隆或多克隆抗體(ti) +Protein A/G瓊脂糖微珠 | GST 標簽蛋白的親(qin) 和層析柱或瓊脂糖微珠 | GFP單克隆或多克隆抗體(ti) +Protein A/G瓊脂糖微珠 |
目的 | 弱GFP蛋白樣品的富集；或後期實驗 | 可以用beads直接測定酶活 | 蛋白-蛋白相互作用，一般驗證體(ti) 內(nei) 的蛋白互作 | 蛋白-蛋白相互作用，一般驗證體(ti) 外的蛋白互作 | 蛋白-相互作用 |
（1）實驗不同，裂解的細胞不同；pulldown 加入的是GFP融合蛋白和第二標簽融合蛋白的裂解物；chip實驗為(wei) 細胞固定步驟，染色質斷裂步驟；
實驗不同，加入的裂解物不同；chip實驗加入的為(wei) 斷裂的-蛋白複合物；
（2） GFP-Trap 用於(yu) IP 實驗（Immunoprecipitation）（免疫沉澱）和Co-IP 實驗（免疫共沉澱） ：
Co-IP 實驗（Co-Immunoprecipitation）（免疫共沉澱）原理圖
| 傳(chuan) 統IP | GFP-Trap用於(yu) IP | 傳(chuan) 統Co-IP | GFP-Trap用於(yu) Co-IP |
| A | B | C | D |
實驗原理 | 抗體(ti) 與(yu) 細胞裂解液或上清中相應蛋白結合後，再與(yu) 蛋白A/G（ProteinA/G）或二抗偶聯的agarose珠子孵育，得到蛋白複合物，洗脫蛋白。 | 細胞裂解液或上清中的GFP融合蛋白與(yu) GFP-Trap孵育，得到蛋白複合物，洗脫蛋白。 | 細胞非變性條件下裂解，完整胞內(nei) 存在的許多蛋白質－蛋白質間的相互作用被保留。如果用蛋白質X的抗體(ti) 免疫沉澱X，與(yu) X在體(ti) 內(nei) 結合的蛋白質Y也能沉澱下來。結合的實驗原理同A/B | |
目的 | 得到純化的蛋白或進行後期實驗 | 同A | 研究蛋白質相互作用 | |
後期實驗 | 洗脫的蛋白采用SDS-Page 跑膠，采用GFP 抗體(ti) western blot進行鑒定。 | 沉澱的蛋白質複合物采用SDS-Page 跑膠，western blot 鑒定，也可利用質譜進行後續分析。 | ||
時間 | 長，超過一天 | 短，30min | 同A | 同B |
步驟 | 多，超過20個(ge) 步驟 | 少，僅(jin) 需6個(ge) 步驟 | 同A | 同B |
特異性 | 普通抗體(ti) 特異性不高 | 羊駝抗體(ti) ，特異性高 | 同A | 同B |
使用產(chan) 品 | 可選用特異性抗體(ti) 或GFP單克隆或多克隆抗體(ti) +Protein A/G瓊脂糖微珠 | GFP抗體(ti) -瓊脂糖珠子，RFP-Trap，GST-Trap，Dnmt1-Trap | 同A | 同B |
適用性 | 通用方法，適合麵寬 | 有GFP，RFP，GST，Dnmt1-Trap等4個(ge) 品種的標簽蛋白Trap 可選 | 同A | 同B |
產(chan) 物 | 純度不高 | 純度高，對比見下左圖 |
|
|
Nano-Traps主要產(chan) 品見表：
| 品牌 | 貨號 | 品名 | 規格 | 價(jia) 格 |
GFP-Trap? | Chromo tek | gta-10 | GFP-Trap?, coupled to agarose | 10 rxns | 2000 |
Chromo tek | gta-20 | GFP-Trap?, coupled to agarose | 20 rxns | 6700 | |
Chromo tek | gta-100 | GFP-Trap?, coupled to agarose | 100 rxns | 27090 | |
Chromo tek | gta-200 | GFP-Trap? coupled to agarose | 200 rxns | 48240 | |
Chromo tek | gta-400 | GFP-Trap? coupled to agarose | 400 rxns | 84330 | |
Chromo tek | gtak-20 | GFP-Trap? coupled to agarose kit | 20 rxns | 8400 | |
Chromo tek | gtm-20 | GFP-Trap? coupled to magnetic beads | 20 rxns | 6700 | |
Chromo tek | gtm-100 | GFP-Trap? coupled to magnetic beads | 100 rxns | 27090 | |
Chromo tek | gtm-200 | GFP-Trap? coupled to magnetic beads | 200 rxns | 5360 | |
Chromo tek | gtp-96 | GFP-multiTrap?, black 96 well plate | 1 pc | 4100 | |
Chromo tek | gtp-96 | GFP-multiTrap?, black 96 well plate | 5 pc | 15600 | |
Chromo tek | gtm-400 | GFP-Trap? coupled to magnetic beads | 400 rxns | 84330 | |
Chromo tek | gtmk-20 | GFP-Trap? coupled to magnetic beads kit | 20 rxns | 8400 | |
Chromo tek | gt-250 | GFP-Trap? free protein | 250 μg | 4500 | |
RFP-Trap? | Chromo tek | rta 10 | RFP-Trap?, coupled to agarose | 10rxns | 2000 |
Chromo tek | rta 20 | RFP-Trap?, coupled to agarose | 20rxns | 6700 | |
Chromo tek | rta 100 | RFP-Trap?, coupled to agarose | 100 rxns | 27090 | |
Chromo tek | rta200 | RFP-Trap?, coupled to agarose | 200rxns | 5360 | |
Chromo tek | rta 400 | RFP-Trap?, coupled to agarose | 400rxns | 84330 | |
Chromo tek | rtak-20 | RFP-Trap?, coupled to agarose, | 20 rxns | 8400 | |
Chromo tek | rt-250 | RFP-Trap?, free protein | 250 μg | 4500 | |
GST-Trap | Chromo tek | stm-10 | GST-Trap?, coupled to magnetic beads | 10 rxns | 2000 |
Chromo tek | stm-20 | GST-Trap?, coupled to magnetic beads | 20 rxns | 6700 | |
Chromo tek | stm-100 | GST-Trap?, coupled to magnetic beads | 100 rxns | 27090 | |
Chromo tek | stm-200 | GST-Trap?, coupled to magnetic beads | 200 rxns | 48240 | |
Chromo tek | stm-400 | GST-Trap?, coupled to magnetic beads | 400 rxns | 84330 | |
Chromo tek | stmk-20 | GST-Trap?, coupled to magnetic beads, kit | 20 rxns | 8400 | |
Chromo tek | st-250 | GST-Trap?, free protein | 250 μg | 4500 | |
Dnmt1-Trap | Chromo tek | dta-10 | Dnmt1-Trap, coupled to agarose | 10 rxns | 2000 |
Chromo tek | dta-20 | Dnmt1-Trap, coupled to agarose | 20 rxns | 6700 | |
Chromo tek | dta-100 | Dnmt1-Trap, coupled to agarose | 100 rxns | 27090 | |
Chromo tek | dta-200 | Dnmt1-Trap, coupled to agarose | 200 rxns | 48240 | |
Chromo tek | dta-400 | Dnmt1-Trap, coupled to agarose | 400 rxns | 84330 | |
Chromo tek | dtak-20 | Dnmt1-Trap, coupled to agarose, kit | 20rxns | 8400 | |
Chromo tek | dt-250 | Dnmt1-Trap,freeprotein | 250μg | 4500 | |
Binding Controls | Chromo tek | bab-20 | Blocked agarose beads (binding control) | 500 μl (20 rxns) | 1500 |
Chromo tek | bmp-20 | Blocked magnetic particles ( binding control) | 500 μ l ( 20 rxns) | 1500 |
產(chan) 品二：
Nano-booster是利用Atto公司的熒光素共價(jia) 結合到特異性GFP抗體(ti) 上；當GFP 融合蛋白信號比較弱的時候，或者熒光蛋白變性後，具有再激活的作用。
在研究活細胞中蛋白定位和動力學的過程中是不是會(hui) 有如下的困惑：
1.固定樣品中細胞表達的熒光融合蛋白信號強度在生理表達水平通常很低？
2.熒光蛋白的耐光性和量子效率達不到超分辨顯微鏡的要求（如：3D-SIM, STED或 STORM/ PALM）？
3.許多細胞生物學方法如Hcl處理的BrdU檢測，EdU-Click-It處理或者熱變性的熒光原位雜交（FISH）會(hui) 幹擾熒光融合蛋白信號的檢測，需要重新激活GFP 信號？
優(you) 點：
優(you) 點一：抗體(ti) 好---------Nano-Boostern 采用的抗體(ti) 是基於(yu) alpaca的單域抗體(ti) 片段（VHHS）；具有分子量小（15Kda）、穩定（70℃仍保持穩定），高親(qin) 和力（高特異性性結合GFP蛋白），無普通抗體(ti) 輕鏈與(yu) 重鏈汙染等一係列優(you) 點等優(you) 點；GFP抗體(ti) 可以特異性結合綠色熒光蛋白的衍生物，如eGFP, wtGFP, GFP S65T，TagGFP，不與(yu) RFP衍生蛋白結合。
優(you) 點二：Atto公司的熒光素，具有增強熒光的作用；
優(you) 點三：作用效果好：
1、作為(wei) 熒光增強劑使用；
2、對變性熒光蛋白具有再激活作用；
3、不僅(jin) 能夠增強信號，還能夠增加熒光蛋白熒光穩定性。
優(you) 點四：產(chan) 品多：不僅(jin) 有GFP booster，還有RFP booster；
Nano Booster 產(chan) 品應用：
1、產(chan) 品實驗方法：免疫熒光（IF）,免疫組化（IHC）；
2、產(chan) 品使用材料：細胞係，組織切片；
3、產(chan) 品應用方向：熒光顯微鏡，激光共聚焦顯微鏡，超分辨率顯微鏡（3D-SIM，PALM, STED,STORM）；
實驗結果改進示例：
實驗應用：
上圖：比較 HeLa 細胞係核表達的GFP-融合蛋白，GFP 信號增強（G FP-Booster_Atto488使用前和使用後）由用戶確定適當的稀釋倍數。
EdU-Click-iT? 處理會(hui) 導致GFP 信號的毀壞。 GFP-Booster標記了GFP 融合蛋白，因此有激活和加強熒光信號的作用(稀釋比例 1/200, 1 h at RT) (GFP-Booster with EdU-Click-iT? protocol)。下圖：GFP-Dnmt1 融合蛋白，三色熒光檢測，同時檢測 紅色：5’ EdU-Click-iT? Alexa Fluor 594信號；綠色，結合了GFP Booster 信號；藍色，DAPI 信號（在EdU-Click-iT? 處理後GFP Booster）
Nano-booster主要產(chan) 品見下表：
|
| 貨號 | 品名 | 規格 | 價(jia) 格 |
GFP-Booster | Chromo tek | gba488-TS | GFP-Booster_atto488-TS | 50 μg | 2500 |
Chromo tek | gba488 | GFP-Booster_atto488 | 100 μg | 5400 | |
Chromo tek | gba-647N | GFP-Booster-Atto 647N | 100 μg | 詢價(jia) | |
Chromo tek | gbdl-650-TS | GFP-Booster- Atto 647N | 50 μg | 詢價(jia) | |
Chromo tek | gba-594 | GFP-Booster-Atto 594 | 100 μg | 詢價(jia) | |
RFP-Booster | Chromo tek | rba594-TS | RFP Booster atto594 TS | 50u g | 2500 |
Chromo tek | rba594 | RFP-Booster_atto594 | 100 μg | 5400 | |
Chromo tek | rbdl-650-TS | RFP-Booster- Atto 650ts | 50 μg | 詢價(jia) | |
Chromo tek | rba-700 | RFP-Booster-Atto 700 | 100 μg | 詢價(jia) | |
Chromo tek | rba-488 | RFP-Booster-Atto 488 | 100 μg | 詢價(jia) |
備注：Invtrogen新推出的Click-iT? EdU檢測也是以檢測新合成中摻入的核苷類似物為(wei) 基礎，但該方法所采用的核苷類似物是EdU，而且不是通過抗體(ti) 檢測，而是基於(yu) 一個(ge) click反應 --銅催化的疊氮化物和炔烴之間的共價(jia) 反應。Click-iT檢測避免了BrdU檢測所需的苛刻處理條件，可避免變性，維持樣本的形態，因而提供了一種更可靠且更簡單的方法進行細胞增殖檢測。
DAPI，是一種能夠與(yu) 強力結合的熒光染料，常用與(yu) 熒光顯微鏡觀測。因為(wei) DAPI可以透過完整的細胞膜，它可以用於(yu) 活細胞和固定細胞的染色。在熒光顯微鏡觀察下，DAPI染劑是利用紫外光波長的光線激發。當DAPI與(yu) 雙股結合時，大吸收波長為(wei) 358nm，大發射波長為(wei) 461nm，其發散光的波長範圍含蓋了藍色至青綠色。 所以不會(hui) 影響綠色熒光蛋白的觀測。
產(chan) 品三：Chromobodies
ChromoTek公司的Chromobodies?是一種新的極其微小的細胞內(nei) 功能抗體(ti) 。它是基於(yu) 融合有熒光蛋白(e.g.Tag GFP or Tag RFPfrom Evrogen)的來自羊駱抗體(ti) 重鏈的抗原結合域結構(VHH)。和普通抗體(ti) 不同的是，這些創新的熒光納米探針可以使活細胞的結構和進程實時分析和可視化。因此，Chromobodies? 是做研究細胞內(nei) 研究包含高含量分析（HCA）的一種新的理想試劑。
除了穩定細胞株，你也可以得到Chromobody?質粒，它允許你創建自己的細胞係或瞬時表達Chromobody?。
所有Chromobody?結合域都是經過精心挑選，以不幹擾內(nei) 源性蛋白質的功能，並提供了*的機會(hui) 來標記活細胞中天然蛋白。
產(chan) 品形式：質粒或者細胞係產(chan) 品。
Chromobodies係列產(chan) 品見下表：
Actin Chromobody
貨號 | Chromo tek | 品名 | 規格 | 價(jia) 格 |
dcg | Chromo tek | Dnmt1-Chromobody?plasmid,αDnmt1-GFP | 20μg | 14900 |
dcr | Chromo tek | Dnmt1-Chromobody?plasmid,αDnmt1-RFP | 20μg | 14900 |
ccg | Chromo tek | Cell Cycle Chromobody? plasmid αPCNA GFP | 20 μg | 14900 |
ccr | Chromo tek | Cell Cycle Chromobody? plasmid PCNA RFP | 20 μg | 14900 |
lcg | Chromo tek | Lamin Chromobody? plasmid, αLamin-GFP | 20 μg | 14900 |
lcr | Chromo tek | Lamin Chromobody? plasmid, αLamin-RFP | 20 μg | 14900 |
acg | Chromo tek | Actin Chromobody? plasmid, αActin-GFP | 20 μg | 14900 |
acr | Chromo tek | Actin Chromobody? plasmid, αActin-RFP | 20 μg | 14900 |
產(chan) 品係列四：
ChromoTek推出一係列高質量常見抗體(ti) 見下表：
熒光標簽抗體(ti)
貨號 | 品牌 | 品名 | 規格 | 價(jia) 格 |
3f5 | Chromo tek | RFP antibody mouse monoclonal | 100 μg | 3900 |
5f8 | Chromo tek | RFP antibody rat monoclonal | 100 μg | 3900 |
3h9 | Chromo tek | GFP antibody, rat monoclonal | 100 μg | 3900 |
標簽抗體(ti)
貨號 | 品牌 | 品名 | 規格 | 價(jia) 格 |
6g9 | Chromo tek | GST antibody, rat monoclonal | 100 μ l | 3900 |
6f7 | Chromo tek | FLAG antibody, rat monoclonal | 100 μg | 3900 |
9E1 | Chromo tek | c-Myc antibody, rat monoclonal | 100 μg | 3900 |
7c9 | Chromo tek | HA antibody, rat monoclonal | 100 μg | 3900 |
目的蛋白抗體(ti)
貨號 | 品牌 | 品名 | 規格 | 價(jia) 格 |
2e8 | Chromo tek | Dnmt1antibody,ratmonoclonal | 500μl | 4900 |
2e8ts | Chromo tek | Dnmt1antibody,ratmonoclonal | 125μl | 2000 |
16d10 | Chromo tek | PCNA antibody rat monoclonal | 100 μg | 4900 |
16d10ts | Chromo tek | PCNA antibody rat monoclonal | 25 μg | 2000 |
4b8 | Chromo tek | Ago1 antibody, rat monoclonal | 100 μg | 5400 |
4b8ts | Chromo tek | Ago1 antibody, rat monoclonal | 25 μg | 2000 |
11a9 | Chromo tek | Ago2 antibody, rat monoclonal | 100 μg | 5400 |
11a9ts | Chromo tek | Ago2 antibody, rat monoclonal | 25 μg | 2000 |
1c7 | Chromo tek | RNA Pol II CTD, unphosphorylated CTD | 5 ml | 5400 |
1c7ts | Chromo tek | RNA Pol II CTD, unphosphorylated CTD | 1 ml | 2000 |
3d12 | Chromo tek | RNA Pol II CTD, phos. Tyrosine 1 | 5 ml | 5400 |
3d12ts | Chromo tek | RNA Pol II CTD, phos. Tyrosine 1 | 1 ml | 2000 |
3e10 | Chromo tek | RNA Pol II CTD, phos. Serine 2 | 5 ml | 5400 |
3e10ts | Chromo tek | RNA Pol II CTD, phos. Serine 2 | 1 ml | 2000 |
6d7 | Chromo tek | RNA Pol II CTD, phos. Threonine 4 | 5 ml | 5400 |
6d7ts | Chromo tek | RNA Pol II CTD, phos. Threonine 4 | 1 ml | 2000 |
3e8 | Chromo tek | RNA Pol II CTD, phos. Serine 5 | 5 ml | 5400 |
3e8ts | Chromo tek | RNA Pol II CTD, phos. Serine 5 | 1 ml | 2000 |
4e12 | Chromo tek | RNA Pol II CTD, phos. Serine 7 | 5 ml | 5400 |
4e12ts | Chromo tek | RNA Pol II CTD, phos. Serine 7 | 1 ml | 2000 |
電話
QQ掃一掃
