蛋白酶k現貨供應

蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶，用於(yu) 生物樣品中蛋白質的一般降解。從(cong) 林伯氏白色念球菌（tritirachium album limber）中純化得到。據資料顯示：該酶有兩(liang) 個(ge) ca2+結合位點，它們(men) 離酶的活性中心有一定距離，與(yu) 催化機理並無直接關(guan) 係。然而，如果從(cong) 該酶中除去ca2+，由於(yu) 出現遠程的結構變化，催化活性將喪(sang) 失80%左右，但其剩餘(yu) 活性通常已足以降解在一般情況下汙染酸製品的蛋白質。所以，蛋白酶k消化過程中通常加入edta（以抑製依賴於(yu) mg2+的核酸酶的作用）。但是，如果要消化對蛋白酶k具有較強耐性的蛋白，如角蛋白一類，則可能需要使用含有1mmol/l ca2+而不含edta的緩衝(chong) 液。在消化完畢後、純化核酸前要加入EGTA（ph8.0）至終濃度為(wei) 2mmol/l,以鼇合ca2+。

　　蛋白酶K，是一種切割活性較廣的絲(si) 氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經純化去除了RNA酶和酶活性。由於(yu) 蛋白酶K在尿素和SDS中穩定，還具有降解天然蛋白質的能力，因而它應用很廣泛，包括製備脈衝(chong) 電泳的染色體(ti) ，蛋白質印跡以及去除和RNA製備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50—100μg/ml。在較廣的pH範圍內(nei) （pH 4-12.5）均有活性。

　　推薦反應緩衝(chong) 液：50mM Tris-HCl （pH7.5）,10mM CaCl2 。

　　蛋白酶K配製標準：20mg/ml蛋白酶K配製標準（proteinase K）：將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，輕輕搖動，直至蛋白酶K*溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然後分裝成小份貯存於(yu) -20℃。

蛋白酶k的作用

　　值得注意的是，蛋白酶K在原位雜交技術中通常用於(yu) 雜交前的處理,它具有消化包圍靶蛋白質的作用,以增加探針與(yu) 靶核酸結合的機會(hui) ,提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時,都會(hui) 對細胞的結構有一定的破壞,導致組織切片的脫落,細胞核的消失,從(cong) 而影響雜交結果.EDTA緩衝(chong) 液可以替代蛋白酶K的作用,解決(jue) 上述出現的問題,並能達到理想的染色效果.

蛋白酶k的保存

　　保存：保存在－20℃冰箱裏，避免反複凍融，有效保證12月。

　　孵育溫度為(wei) 55至65℃，理想孵育溫度為(wei) 58℃，孵育時間為(wei) 15分鍾至48小時；理想孵育時間為(wei) 2小時。

編輯本段廣泛應用

　　蛋白酶K已廣泛應用在皮革、毛皮、絲(si) 綢、醫藥、食品、釀造等方麵。皮革工業(ye) 的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶，既節省時間，又改善勞動衛生條件。蛋白酶還可用於(yu) 蠶絲(si) 脫膠、肉類嫩化、酒類澄清。臨(lin) 床上可作藥用，如用胃蛋白酶治療消化不良，用酸性蛋白酶治療支氣管炎，用彈性蛋白酶治療脈管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對外科化膿性創口的淨化及胸腔間漿膜粘連的治療。加酶洗衣粉是洗滌劑中的新產(chan) 品，含堿性蛋白酶，能去除衣物上的血漬和蛋白汙物，但使用時注意不要接觸皮膚，以免損傷(shang) 皮膚表麵的蛋白質，引起皮疹、濕疹等過敏現象。

產(chan) 品簡介：
貨號： GPE-2009001
批號： 201003008
規格： 每個(ge) 獨立包裝中含有100毫克的蛋白酶K凍幹粉
比活性值： 40 U/mg蛋白，17.5 U/mg幹粉
來源種屬： 林伯氏白色念球菌（Tritirachium album limber）
相對分子質量：29,730
貯存條件：
幹粉狀態可在2~4ºC條件下低溫保藏。使用時，建議將每個(ge) 獨立包裝的幹粉全部溶解，分裝為(wei) 適當體(ti) 積後，-20ºC貯存。
正確的貯存條件下，幹粉狀態的有效期可達一年。液體(ti) 狀態的有效期為(wei) 半年。打開包裝使用後，如果在2~8ºC環境下放置超過一周時間，建議過濾除菌後再用於(yu) 實驗。
貯存緩衝(chong) 液：20 mM Tris-HCl （pH 7.4），1 mM氯化鈣，50%甘油（稀釋用緩衝(chong) 液不含甘油）。
質量控製：
活性單位定義(yi)
37ºC、pH 7.5條件下，每分鍾可水解底物酪蛋白生成1 μmol酪氨酸的蛋白酶K 的量，定義(yi) 為(wei) 一個(ge) 單位（U）。
脫氧核糖核酸酶殘留
以λ 為(wei) 底物，37ºC消化6小時以上，未檢測到脫氧核糖核酸酶活性。
核糖核酸酶殘留
25ºC消化16小時以上，未檢測到核糖核酸酶活性。
產(chan) 品用途：
蛋白酶K是一種用途廣泛的非特異性的絲(si) 氨酸蛋白酶。在pH 4到pH 12的條件下均有活性，在SDS、尿素或EDTA存在時亦很穩定。常用於(yu) 提取mRNA、基因組，或用於(yu) 從(cong) 各種細胞中提純和RNA時消化雜蛋白。還可用於(yu) 糖蛋白的修飾，以及蛋白質結構研究等方麵。

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