Pfu

目錄號 規格 備注 價格 說明書下載 E002-01A 250U 含dNTP 230元 E002-01B A包裝×5 含dNTP 1035元 E002-02A 250U 不含dNTP  180元 E002-02B A包裝×5 不含dNTP  810元

· Pfu 聚合酶內(nei) 容 （250 U）

· 聚合酶說明 
本酶為(wei) Pyrococcus furiosesus中分離的pfu pol 基因在大腸杆菌中進行表達後經多次純化分離而得。聚合酶具有3’-5’外切酶（校正）活性，當聚合反應發生堿基錯配時，聚合酶的校正活性可將錯配的堿基切除。聚合酶為(wei) 使用範圍zui廣的高保真聚合酶，其錯誤率僅(jin) 為(wei) 1.3x10-6，推薦聚合酶用於(yu) 需高保真的PCR反應。 

· 聚合酶用途 
用於(yu) 要求保真度比較高的PCR反應，包括克隆PCR、片段拚接、引入突變、全基因合成等（參見 Sinobio 實驗方案）。 

· 聚合酶產(chan) 品特點 
高保真：聚合酶是使用zui廣泛的高保真酶，其保真度為(wei) 普通韦德唯一官方酶的10倍。
靈敏：可從(cong) 0.05ng人基因組模板中擴增出特定基因片段（圖例一）。
快捷：PCR反應所必需試劑全集於(yu) 一管之中，數分鍾即可完成反應體(ti) 係配置。
便利：10μl, 25μl 或50μl體(ti) 係全部適用。 

· 質量保證 
經多次柱純化，SDS-PAGE檢測純度大於(yu) 95%；
PCR方法檢測無大腸杆菌殘留，無核酸內(nei) 、外切酶汙染。 

· 聚合酶使用建議

聚合酶產(chan) 生的PCR產(chan) 物為(wei) 平滑末端，無3’端"A"突出，其PCR產(chan) 物的克隆有兩(liang) 種方案。
1. PCR前引物進行5’端加磷修飾或將PCR產(chan) 物磷酸化處理後再直接克隆於(yu) 平滑末端的載體(ti) 中（參見 Sinobio實驗方案）。
2. 將產(chan) 物3’末端加A後再與(yu) T-Vector連接（參見 Sinobio 實驗方案）。
3. 由於(yu) 聚合酶的校對活性可引起引物從(cong) 3′端被部分降解。因此在設計引物時應適當增加引物的長度，理想的引物長度為(wei) 20-30堿基。另外為(wei) 了減少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解，盡量在冰上配置反應體(ti) 係，並zui後加入Pfu酶。

· 相關(guan) 圖片